Análisis de la flora microbiana del semen bovino (Bos taurus) antes y después del congelamiento en la Estación Experimental Choquenaira

Abstract

Se determinó mediante cultivo la presencia bacteriana en el semen bovino de 4 toros sementales de las razas Pardo suizo y Holstein, en el laboratorio de crioconservación de semen bovino de la Estación Experimental de Choquenaira, Provincia Ingavi, del Departamento de La Paz, dependiente de la Facultad de Agronomía, U.M.S.A. El presente estudio se efectúo para determinar el grado de contaminación que puede existir en el proceso de crioconservación del semen bovino. Se utilizaron cuatro reproductores de la estación, 3 pertenecientes a la raza Holstein y uno de la raza pardo suizo; se realizo tres diferentes tomas de muestras de cada uno de los animales, la primera muestra se obtuvo al efectuar el lavado prepucial, para el cual se uso la solución del suero fisiológico, seguidamente se realizo la colecta de semen fresco; utilizando la técnica de la vagina artificial, y la tercera muestra perteneció a las pajillas congeladas del laboratorio de criconservación de la estación. Para el análisis bacteriológico, se procesaron pajillas de los cuatro sementales, se utilizaron medios generales (Agar sangre), selectivos, (Mac conkey), y específicos (Agar chocolate). Las muestras para el cultivo se obtuvieron del lavado prepucial, semen fresco y semen congelado ó criopreservado, las cuales fueron transportadas hasta el laboratorio Gen y Vida (ubicado en la Avenida Busch del departamento de La Paz). En las muestras se observo crecimiento bacteriano, al ser sembradas por triplicado en cajas Petri, incubándose aeróbicamente a 37° C por 48 horas, las placas se incubaron en una atmosfera combinada de 10 % de dióxido de carbono y 90 % de oxigeno. Cada uno de los aislamientos obtenidos se sometió a pruebas de diferenciación bioquímicas, así como la tinción Gram y azul de metileno, determinación de grado de toxicidad, prueba de catalasa, reducción de nitratos, H2S y TSI, además de realizar pruebas de susceptibilidad antimicrobiana. xi Entre los microorganismos identificados se encuentran Proteus mirabilis, Escherichia coli. Este grupo de microorganismos se encuentran en cantidades pequeñas como parte de la flora normal de vías respiratorias superiores y vías genitales; se aíslan frecuentemente en el suelo y agua, pero se vuelven patógenas cuando alcanzan tejidos ajenos a sus hábitats. Otros microorganismos aislados en este estudio fueron bacterias saprofitas, Sthaphylococcus sp, Streptococcus sp, son microorganismos que se consideran patógenos oportunistas del tracto respiratorio y vías urinarias. La presencia de Pseudomonas aeuroginosa, se observo en un solo animal, siendo este el microorganismo a considerar, ya que este germen ha sido relacionado con una baja concentración de espermatozoides vivos, daño acrosomal, y por ende disminución en la capacidad fertilizante del semen descongelado de bovino. Con relación a la resistencia de los microorganismos a ciertos antibióticos se encontró que los antibióticos que pueden ser usados en la congelación del semen bovino son la Gentamicina, Ceftazidima, Ciprofloxacina y amoxicilina + acido clavulanico, trimetropim + sulfametoxoazol solo en el caso de Sthaphylococcus sp. En el semen congelado se obtuvo un conteo de 850 UFC/ml por la presencia de Pseudomona aeruginosa solamente en uno de los sementales. También se obtuvieron recuentos de 300, 200, 250 y 300 UFC/ml, tanto para Staphylococcus (HAVANO), Streptococcus sp (DANTE), Escherichia coli (NENE) y proteus mirabilis (DANTE, HAVANO, OLIVER Y NENE) respectivamente.