Estudio de consorcios microbianos anaerobios extremófilos en relación a su potencial de producción de proteasas y amilasas colectados de geisers ubicados en el parque nacional sajama, departamento de oruro, bolivia.

Abstract

El estudio de enzimas extremófilas es importante para la biotecnología industrial debido a que tienen propiedades de resistencia a altas y bajas temperaturas, solve ntes orgánicos y pH´s extremos. Las amilasas y proteasas tienen muchas aplicaciones industriales especialmente en la industria de los detergentes, industria de alimentos, industria del cuero y biorremediación de suelos y aguas contaminadas. Los microorgani smos extremófilos producen más de 55 proteínas extracelulares, muchas de ellas con aplicación industrial.

En el presente trabajo se realizó la colecta de muestras de consorcios microbianos extremófilos, con características halófilas y termófilas; de geisers ubicados en el Parque Nacional Sajama, departamento de Oruro, Bolivia. Se realizó un cultivo primario, selectivo para microorganismos que producen amilasas y proteasas. Se realizaron curvas de Biomasa Microbiana Vs. Actividad Enzimática de 14 consorcios productores de Amilasas y Proteasas, seleccionando al mejor consorcio productor de enzima, se realizó la optimización del medio de cultivo con ayuda de diseños factoriales, los cuales presentan dos variables independientes: pH y concentración de Cloruro de Sodio (NaCl) y como variable independiente la Actividad Enzimática (Proteasa o Amilasa). Finalizando con la identificación molecular de los consorcios seleccionados.

Se seleccionó un consorcio con alta producción de amilasas, HMA-2, que además produce biofilm, realizando la optimización del medio de cultivo, siendo estadísticamente significativa la modificación del pH a un valor de 11 para la producción enzimática, presentando también un cambio en la conformación del biofilm a ese pH. Se realizó la identificación molecular del consorcio, por el método de Hibridación Fluorescente in situ estando el compuesto de microorganismos del grupo de las bacterias sulfato-reductoras y presumiblemente la presencia de Arqueas.

Para el consorcio productor de proteases, E-1p dilución 10-4, se realizó el diseño factorial siendo estadísticamente significativa la interacción de las dos variables independientes, llegando a obtener una Actividad Proteolítica de 13.908 UI/mL, siendo ésta vez 6 veces mayor que la máxima actividad del consorcio inicial. Se realizó la identificación molecular del mismo, por el método de Hibridación Fluorescente in situ estando el consorcio compuesto microorganismos del grupo de las bacterias sulfato -reductoras y presumiblemente Arqueas metanogénicas.