Caracterización de tres sistemas de identificación genética humana en manchas de sangre de data antigua.
Fecha
2019Autor
Cadena Mamani, Rusvania
Tutor
Luna Barrón, Ruddy, tutor
Torrico Arzady, Bernardo Nicolas, tutor
Metadatos
Mostrar el registro completo del ítemResumen
En el presente trabajo se caracterizó tres sistemas de identificación genética humana los cuales son: las secuencias cortas en tándem autosómicos (strs), secuencias cortas en tándem del cromosoma y (y-strs), además de las secuencias del ácido desoxirribonucleico mitocondrial que comprenden las regiones hipervariable i y la región hipervariable ii (hvi y hvii del adnmt). a partir de manchas de sangre de data antigua conservadas a temperatura ambiente y manchas sometidas a degradación inducida. inicialmente se realizó las pruebas orientativas colorimétricas de sangre prosiguiendo con la tipificación del adn el mismo que comprende las siguientes fases: extracción, cuantificación, la pcr y electroforesis capilar. la caracterización de manchas de sangre de data antigua se la misma se considera un reto técnico debido a las mismas fueron sometidas a condiciones extremas de exposición (radiación uv ionizante, la data de la muestra, temperatura a la cual estuvo expuesta y otros factores), que influyen en el éxito o el fracaso del análisis molecular de estas pruebas, para la caracterización de los tres sistemas de identificación genética humana. la metodología consistió en la obtención y preparación de las muestras, se realizó las pruebas orientativas colorimétricas para la detección de sangre a través de las pruebas de leucomalaquita, klastemayer, luminol y la prueba confirmatoria de sangre aplicando el test de identificación rápida de manchas (rsid).prosiguiendo con la extracción del adn, la electroforesis en gel de agarosa, la cuantificación, la amplificación por la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (pcr) de los siguientes marcadores de adn: (strs, y-strs y la región hvi y hvii del adnmt) y finalmente se realizó la electroforesis capilar. Los resultados obtenidos muestran los electroferogramas de secuencias completas y parciales de los diferentes marcadores genéticos utilizados en la detección del adn recuperado de manchas de sangre de data antigua e inducida a degradación. la cantidad relativa de amplicones y el número de nucleótidos obtenidos depende del grado de degradación de cada muestra y el resultado de la amplificación de adn para cada uno de los sistemas; por lo tanto las manchas de sangre de data antigua con mayor tiempo de exposición dentro de la cámara de inducción y otras muestras de data antigua presentaron una baja amplificación causando un desbalance de alelos (picos del electroferograma), observándose una disminución de altura de los picos en los electroferogramas de los sistemas (strs, y-strs) y una disminución del número de nucleótidos en las secuencias. Se realizó la caracterización de los tres sistemas de identificación genética humana, con la finalidad de determinar que sistemas son los más indicados en el trabajo de laboratorio para recuperar el adn degradado de muestras de data antigua y además que han sido sometidas a condiciones extremas ambientales en el transcurso del tiempo. y aplicar este conocimiento en investigación de casos forenses, casos de interés histórico y antropológico, además de la resolución de casos judiciales entre muchos otros.