Evaluación de tres sustratos empleados en la prueba de inmunofluorescencia indirecta que mide anticuerpos antimitocondriales para el diagnóstico de cirrosis biliar primaria.

Abstract

En el presente trabajo se aplicó un método estadístico no convencional para la evaluación de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) para el diagnóstico de cirrosis biliar primaria que detecta anticuerpos antimitocondriales (AMA) . Los sustratos evaluados fueron: tejido de riñón de ratón, células Hep-2 (células epiteliales derivadas del carcinoma laríngeo) y células BHK-21(Monocapa de fibroblastos de riñón de hámster sirio) que se fueron comparando con la prueba confirmatoria Gold Estandar ELISA (ensayo inmunoenzimático) que mide anticuerpos anti antígenos M2 mitocondriales marca (Trinity Biotech). Se seleccionaron dos paneles de sueros provenientes de pacientes que asistieron al Instituto SELADIS (Instituto de Servicios de Laboratorio de Diagnóstico e Investigación en Salud ) con un diagnóstico presuntivo de CBP (Cirrosis Biliar Primaria) con resultados positivos (índice ≥ 1,10 UI/ml) de la prueba de AMA(Anticuerpos Antimitocondriales) por ELISA, los cuales fueron seleccionados en base a los resultados de la prueba de AMA por ELISA marca (Trinity Biotech) . Los controles negativos eran sueros de pacientes que no tenían antecedentes de enfermedad hepática y presentaban resultados de ELISA para AMA negativos ≤ a 0,90UI/ml. Se determinó que de los tres sustratos evaluados los basados en líneas celulares tienen utilidad limitada, especialmente los que utilizan la línea celular BHK-21 con eficiencia del 56%, sensibilidad del 48% y especificidad de 64%. Si bien este sustrato es considerado como bueno para determinar la presencia de anticuerpos antinucleares, no lo es para el diagnóstico de CBP debido a que tiene una concordancia baja según (Kappa= 0.12) con la prueba Gold estándar (ELISA-AMA). Con la línea celular Hep-2 hubo una concordancia moderada ( Kappa= 0,6) frente al Gold estándar, mostró tener una especificidad del 100% ,sensibilidad de 60% notando que con este sustrato no se observa una diferencia significativa con las células BHK-21. Los cortes histológicos de riñón de ratón mostraron ser los más eficientes con 92% de sensibilidad y especificidad del 92% respectivamente. Además mostraron emitir resultados de mayor concordancia con el método de ELISA (Kappa= 0,84). Estos resultados nos muestran que el sustrato ideal para determinar AMA son los cortes histológicos método evaluado en el laboratorio de Histocompatibilidad e Inmunogenética del Instituto SELADIS es fiable como los ofertados por las diferentes casas comerciales. Conociendo tanto la sensibilidad y especificidad del ELISA es 95% y de los cortes histológicos del 92% podríamos afirmar que este sustrato también podría ser una alternativa en el diagnóstico de (CBP).