Identificación Molecular de los Virus Papiloma Humano Oncogénicos en Muestras Genitales de Población Boliviana
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Date
2014Author
Bonifaz Pérez, Diego
Rocabado, Omar, Tutor
Mila, Raimon, Tutor
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Los Virus del Papiloma Humano (VPH) constituyen un diverso grupo de virus,
existen aproximadamente 45 genotipos involucrados en infecciones del tracto
anogenital, siendo los genotipos 16 y 18, los más prevalentes y principales
objetivos de varios estudios; las técnicas de detección y genotipificación,
utilizan herramientas moleculares como el ensayo de la Reacción en Cadena
de la Polimerasa (PCR) en Tiempo Real, para identificar de manera simultánea
varios genotipos oncogénicos de VPH.
El presente estudio, pretende determinar la infección por VPH Alto Riesgo en
muestras genitales de población boliviana, mediante la aplicación de tecnología
molecular para la genotipificación de VPH16 y VPH18 por PCR en Tiempo
Real. Los procedimientos utilizados para alcanzar nuestros objetivos, fueron:
La extracción de ADN viral por técnicas basadas en columnas de sílice, la
identificación de los VPH Alto Riesgo por PCR en Tiempo Real, y la
optimización de la PCR en Tiempo Real para la genotipificación de VPH16 y 18.
Los resultados obtenidos en la población total, muestran un 27,2% (IC 95%
19,72 – 34,54) de prevalencia de casos positivos para VPH Alto Riesgo, siendo
su presencia en mujeres del 30,6% (IC 95% 22,42 – 38,77); la presencia de
casos positivos según grupos de edad (chi cuadrado = 0,597 p = 0,43) y por
lugar de residencia (chi cuadrado = 3,73 p = 0,154) muestra que la presencia
de los VPH Alto Riesgo no varía considerablemente, obteniéndose datos
estadísticamente no significativos, teniendo en cuenta, que la recolección de
muestras, correspondía a un tipo de muestreo por conveniencia. En la
optimización de la reacción de PCR Real Time, se realizó el diseño de sondas
TaqMan y primers por software especializado, y se determinó las
concentraciones de reactivos y temperaturas de reacción ideales, obteniéndose
un ensayo de tipo dúplex, útil para determinar en una misma reacción a los
genotipos de VPH16 y 18. La mayor presencia de VPH16 y VPH18 se
determinó en mujeres de 15 a 29 años (40% y 26,7% respectivamente). El
departamento de La Paz fue el que presentó mayores casos de VPH16 (30%),
y para VPH18 no se vieron grandes diferencias, siendo su distribución
semejante en los tres grupos clasificados.
Estos resultados demuestran que mediante la optimización e implementación
de nuevas técnicas moleculares, se puede lograr un mejor seguimiento
epidemiológico sobre la presencia de los VPH Alto Riesgo, siendo importante
mencionar que este estudio también podrá servir como base en el diseño de
nuevos estudios poblacionales y permitirá proporcionar una mejor guía sobre la
diseminación y presencia de los distintos genotipos oncogénicos de VPH en
nuestra población boliviana.