Caracterización de compuestos fenólicos de parastrephia lepidophylla y parastrephia lucida del altiplano boliviano

Abstract

Las especies Parastrephia lepidophylla (supu tola) y Parastrephia lucida (uma tola) son plantas que se encuentran ampliamente distribuidas por la región andina del continente sudamericano abarcando países como Perú, Chile, Argentina y Bolivia, donde son conocidas por diferentes usos como forraje, leña y medicina tradicional. En el presente trabajo se realizó el estudio químico dirigido a la caracterización de compuestos fenólicos de P. lepidophylla y P. lucida provenientes del altiplano sur de Bolivia. Inicialmente se realizó la obtención de extractos etanólicos e hidro-alcohólicos (E-EtOH y E-EtOH: H2O), de los extractos etanólicos se obtuvieron fracciones con éter y Acetato de Etilo (F-éter y F-AcOEt). Tanto de los extractos como de las fracciones se les realizo un análisis fitoquímico preliminar donde se observó la presencia de alcaloides, saponinas, triterpenos compuestos fenólicos, azúcares reductores, taninos y glucósidos cardiotónicos. Mediante el análisis fitoquímico y análisis por placas TLC se seleccionó la fracción de acetato de etilo (F-AcOEt) de P. lepidophylla para el estudio químico más profundo, por ser el que presentaba mayor cantidad de compuestos fenólicos claramente separables. Así, esta fracción fue sometida a sucesivas cromatografías en columnas VLC, logrando así el aislamiento de un compuesto identificado como la flavanona 7-O-metileriodictyol, compuesto muy parecido al eriodictyol, una flavanona ampliamente estudiada, que presenta varias propiedades farmacológicas como antioxidante, antidiabética, antiinflamatoria, anti obesidad, anti cáncer, hepatoprotectora, neuroprotectora y cardioprotectora. Además, siguiendo los objetivos del estudio se obtuvieron fracciones ricas en compuestos fenólicos seleccionando para esto las F-AcOEt de ambas muestras vegetales, estas fueron sometidas a una separación por cromatografía de exclusión molecular Sephadex LH-20 utilizando como fase móvil metanol, obteniéndose 5 fracciones ricas en compuestos fenólicos, 3 provenientes de la muestra P. lepidophylla y 2 de la P. lucida. Se realizó la cuantificación de fenólicos totales en las todas las muestras obtenidas extractos, fracciones de acetato de etilo, fracciones ricas en compuestos fenólicos y el compuesto aislado, mediante la técnica de Folin-Ciocalteu, cuantificando la concentración en Eq. Mg ácido gálico/muestra. Donde las 5 fracciones ricas en compuestos fenólicos y el compuesto aislado muestran una mayor concentración de fenoles totales. Para la caracterización de las fracciones ricas en compuestos fenólicos se realizó un análisis por espectroscopia UV-Vis, se midió las absorbancias de los extractos, fracciones, fracciones ricas en compuestos fenólicos y del compuesto aislado en un rango de 280-400 nm, donde se pudo observar que las fracciones ricas en compuestos fenólicos tienen una mayor absorción en los rangos UV-A (320-400 nm) y UV-B (280-320 nm), mientras que el compuesto presenta un espectro característicos de flavanonas con una alta absorbancia en la región UV-B. Así mismo, se analizaron las fracciones ricas en fenólicos por LC-MS observándose una alta presencia de flavonoides y otros compuestos fenólicos, la mayor parte minoritarios y pocos mayoritarios que fueron analizados mediante los detectores DAD (UV/Vis) y MS. Finalmente, se realizó la determinación de la actividad antioxidante mediante dos técnicas (ABTS) y (DPPH), observándose en la primera un comportamiento similar al de la cuantificación de fenoles totales donde las fracciones ricas en compuestos fenólicos y el compuesto aislado presenta una mayor capacidad inhibidora de radicales libres. En cambio, mediante DPPH, solo la fracción rica en fenólicos de P. lucida (FM2 SLH-20 PB1) presento una gran capacidad captora de radicales libres