Validación del método analítico para la cuantificación de vitaminas (tiamina B1, piridoxina B6, nicotinamida y riboflavina B2) por cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC) en suero vitadex B - solución de gran volumen

Abstract

Esta memoria técnica consiste en la validación de la metodología analítica empleada en Laboratorios Vita S.A. para la Cuantificación de Vitaminas por Cromatografía Liquida de Alta Eficacia (HPLC) en Suero Vitadex B – Solución de Gran Volumen. Tiene como propósito validar el método analítico ya desarrollado donde se cumpla con todos los parámetros establecidos. Con esta validación se tendrá una metodología automatizada que permite analizar de forma rápida y eficiente la separación, cuantificación y detección de los principios activos.

Para determinar que la metodología es exacta y precisa se verificó el cumplimiento de ciertos parámetros de validación como la Selectividad, Linealidad, Precisión y Exactitud que fueron evaluados durante todo el proceso analítico.

Se trabajaron con las siguientes condiciones cromatográficas: HPLC Shimadzzu, columna Kinetex Evo C18 100 A 150 x 4,6 mm de 5 μm (Phenomenex), fase móvil metanol y Acetato de sodio 0,1 M pH 5,4 (20:80), flujo 1 mL/min, longitud de onda de 280 nm y 20 μL de volumen de inyección.

La metodología analítica cumple con los parámetros de aptitud del sistema, Selectividad, Linealidad, Precisión, Exactitud para la cuantificación de los principios activos de Tiamina, Riboflavina, Nicotinamida y Piridoxina. Para realizar el proceso se emplearon las instalaciones de Laboratorios Vita S.A., así como el equipo e instrumentos calificados para desempeñar estas características, y muestras del mismo lote de fabricación, estándares de referencia y reactivos de alta pureza grados HPLC.

En general, el método analítico desarrollado es efectivo y reproducible, cumple con las especificaciones necesarias para su aplicación si se realiza a las mismas condiciones de laboratorio y con los mismos principios activos, permitiendo que se obtengan resultados satisfactorios y confiables.