Estudio comparativo de métodos de laboratorio: ensayo inmunoenzimatico (elisa), western blot y reacción en cadena de la polimerasa (pcr); para el diagnóstico de infección por helicobacter pylori, a partir de muestras de heces, suero y saliva

Abstract

Helicobacter pylori (H. pylori) es un bacilo gram negativo; que infecta la mucosa gástrica de más de la mitad de la población mundial; causa gastritis, enfermedad ulcero-péptica y se asocia tanto con carcinoma gástrico como con linfoma gástrico de células B del tejido linfoide asociado a mucosa. La prevalencia de infección por H. pylori es del 80%, en zonas rurales de Bolivia. En el departamento de La Paz, se reportó una prevalencia de infección por H. pylori del 62,9%. Para diagnosticar la infección por H. pylori se emplean diferentes métodos: métodos que requieren de la endoscopia para la toma de muestra y métodos que no requieren de la endoscopia; entre las que se puede mencionar la prueba del aliento, detección de antígenos en heces, serología (detección de anticuerpos específicos), también se puede incluir la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) en muestra de heces. El presente estudio pretende comparar los métodos de diagnóstico: ELISA, Western Blot y PCR; para el diagnóstico de infección por H. pylori, a partir de muestras de heces, suero y saliva. La población en estudio estuvo constituida por pacientes sintomáticos con una posible infección de H. pylori, se les realizo la endoscopia para el test de ureasa en el Hospital Obrero de la ciudad de La Paz-Bolivia. Se tomó una muestra de sangre y saliva, además de recolectar la muestra de heces, por paciente. Con el suero de los paciente se realizó el método ELISA IgG e IgM anti H. pylori y el método Western Blot IgG anti H. pylori. Con la muestra de saliva se realizó el método Western Blot IgG anti H. pylori y la determinación del antígeno de H. pylori mediante el método ELISA. Con la muestra de heces se realizó la detección del antígeno de H. pylori mediante el método ELISA y la técnica PCR nested. De los 94 pacientes en estudio: 58 tuvieron un test de ureasa positivo y 36 tuvieron un test de ureasa negativo. Al comparar el método ELISA IgG e IgM anti H. pylori con el test de ureasa se obtuvo una sensibilidad del 93% y 53%, una especificidad del 53% y 64% respectivamente. Al comparar el método ELISA antígeno en heces con el test de ureasa se obtuvo una sensibilidad del 80% y especificidad del 67%. Al comparar el método Western Blot IgG anti H. pylori con el test de ureasa se obtuvo una sensibilidad del 96 % y una especificidad del 17%. Por ultimo al comparar la técnica PCR nested con el test de ureasa se obtuvo una sensibilidad del 75% y una especificidad del 46%. Este estudio demostró que los métodos: ELISA, Western blot y PCR poseen una alta sensibilidad, son cómodos para el paciente en la toma de muestra, pueden ser aplicados en estudios a población en general. Además demostramos que no es necesario recurrir a la endoscopia para el diagnóstico de H. pylori, teniendo otras opciones de métodos de diagnóstico. También este estudio fue un paso inicial para la aplicación de muestras de saliva para el diagnóstico de esta infección, tanto en la detección de antígenos o de anticuerpos anti H.